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厂贵9(昆虫卵巢细胞)细胞培养教程

厂贵9(昆虫卵巢细胞)特点：

1.细胞静置培养时半贴壁生长，也可以使用摇瓶悬浮培养

静置培养时细胞会大量附着瓶底生长，呈半贴壁状态，会有少部分细胞悬浮生长；

摇瓶培养时可以很快适应悬浮生长，呈单个或小聚团悬浮生长；

2.对温度极为敏感

细胞于26-28℃空气培养，需要尽量控制温度，保证细胞生长状态；

若温度低于26℃，细胞生长速度会变慢，但恢复温度后生长速度会逐渐恢复，不会对细胞产生过大伤害；

若温度28℃-30℃，细胞生长严重受限；若温度高于30℃，细胞将受不可逆伤害导致无法使用，即使温度恢复也无法恢复正常生长状态；

同时注意使用的培养基、笔叠厂及其他试剂应复温至室温（最好26-28℃），尽量减少观察细胞次数和时间；

3.细胞对吹打、气泡等机械损伤敏感

细胞操作时若吹打力度过大、气泡过多将严重影响细胞生长状态，导致细胞后续存活率降低，注意操作轻柔；

4.细胞可以适应多种培养体系

该细胞多用于真核细胞蛋白表达系统，因此针对该细胞有诸多培养体系，例如Grace's Insect Medium、SF900 II、TNM-FH、ESF921等培养体系，包括含血清的培养体系和不含血清的培养体系，可以根据自身实验需要选择逐步更换为合适的培养体系；

5.细胞冻存存活率不高

实际实验过程中，尚恩发现厂贵9细胞疑似表现出较低的冻存保存能力，冻存后活率会随保存时间增加而逐渐下降，因此若有持续培养该细胞或者快速复苏进行实验需求的实验室建议定期复苏培养细胞并重新冻存以保证细胞冻存活性不会下降至无法接受的范围；

6.细胞贴壁培养后可能会伸出触角

细胞在贴壁培养时，一周左右会有部分细胞伸出较长触角，同一个培养瓶培养时间越长，有触角的细胞可能越多，这是细胞自然现象，非细胞交叉污染或状态不佳；